苹果酸脱氢酶—9001-64-3

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中文：苹果酸脱氢酶

英文：MDH

CAS：9001-64-3

分子式：C9H14N4O3

纯度：≥90%

中文同义词：苹果酸脱氢酶,苹果酸脱氢酶;苹果酸脱氢酶（悬浮液）;

英文同义词：MDH;Malate Dehydrogenase;

技术指标

外观: 白色无定型冻干粉末; 蛋白纯度: ≥90%; 比活性:≥1000 U/mg 酶粉; 丙酮酸激酶:≤0.5%; 乳酸脱氢酶:≤0.01%; 谷氨酸草酸酯转氨酶: ≤0.01%

酶学性质

来源:微生物, 苹果酸脱氢酶; 分类EC 1.1.1.37; 分子量 35kDa(SDS-PAGE); 等电点5.61; Km值:7.8×10-5 M(Oxaloacetate); 1.2×10-4 M(NADH); 抑制剂:Hg2+; 最适pH：8.0-9.0; 最适温度：60℃; pH稳定性pH 4.0-9.0(25℃,16 h) 热稳定性:50℃ 以下稳定(pH 7.5,30 min); 稳定性:-25～-15℃ 静置保存 12 个月保持90% 以上活性. 用途: 用于谷草转氨酶试剂的研发和大量制备。

酶活定义: 单位酶活定义为在下述反应条件下每分钟消耗 1μmol NADH 所需的酶量。

试剂准备

试剂I：100 mM pH 7.5磷酸钾缓冲液。

试剂II：15 mM草酰乙酸（2.0 mg/mL草酰乙酸，用冷的试剂I溶解）。

试剂III：6.0 mM NADH。

试剂IV：100 mM磷酸钾缓冲液，pH7.5，含0.2%BSA。

待测样品：用试剂IV将酶液稀释至0.05-0.5U/mL。

操作步骤

1.在3 mL比色皿中加入2.8 mL试剂I，0.1mL试剂II，0.1 mL试剂III，30℃预热5 min。

2.加入50μL待测样品，混匀。

3.在340 nm处测定30℃下，1分钟内吸光度的变化率。